5. Blokering af endogen peroxidaseaktivitet 5 min. 6. Skyl i Wash-buffer 5 min. 7. Inkubation med primært antistof fra mus eller kanin RTU eller fortyndet i EnVision FLEX Antibody Diluent (se fortyndingsliste) Mængde: 300 µl pr. glas (100 µl pr. drypzone) Ca. 20 min. 8. Skyl i Wash-buffer 5 min. 9. Evt. Inkubation med EnVision FLEX+ Mouse/Rabbit Linker Mængde: 300 µl pr. glas (100 µl pr. drypzone) 15 min. 10. Skyl i Wash-buffer 5 min. 11. Inkubation med EnVision FLEX /HRP Mængde: 600 µl pr. glas (200 µl pr. drypzone) 20 min. 12. Skyl i Wash-buffer 5 min. 13. Fremkaldning i EnVision Flex DAB+ chromogen-substrat opl. Til Melan A NovaRed og/eller HMB45 NovaRED bruges Novared opløsning. Mængde: 600 µl pr. glas (200 µl pr. drypzone) 10 min. 14. Skyl i Wash-buffer 5 min. 15. Kernefarvning og montering på på dako coverstainer program Autostainer