Immun, Ventana, ISH

Målgrupper og anvendelsesområde
Definitioner
Fremgangsmåde
Ansvar og organisering
Referencer, lovgivning og faglig evidens samt links hertil
Bilag
 

 

Målgrupper og anvendelsesområde

Bioanalytikere i immunfunktion

Tilbage til top

Definitioner

Ventana: Immunfarvemaskine til farvning af P16 og ISH

ISH: In Situ Hybridization

Tilbage til top

Fremgangsmåde

Bestilling, skæring og klargøring af ISH-farvning:

Som ved normal bestilling af ekstra farvninger. Vær opmærksom på at farvningerne har tilføjet "ISH" 

Etiketterne skal sættes på TOMO-glas med kontrolvæv. Derudover skæres de som almindelige immunfarvninger.

Glassene skal i varmeskab i 20 min ved 60 grader.

Når de har været i varmeskab, skal glassene have Clear Overlay-film på etiketten, inden de sættes på Ventana.

 

Påsætning af reagenser og glas:

Sættet med reagenser står i køleskabet med de øvrige reagenser til p16, hvis ikke de allerede findes på maskinen. ISH-farvninger bliver fremkaldt med iView Blue, som giver en blå reaktion og kernefarvningen bliver rød (Red Counterstain II). 

Husk at lave RAP/landing zone i god tid, da der kan være længere mellem de mulige tidspunkter, når maskinen er fyldt (især som eftermiddagen). 

Glassene skal sættes på Ventana som ved almindelig P16, men husk at markere skufferne med skiltene "ISH-farvning". Farvningen tager ca. 5 timer.

 

Aftagning efter endt farvning:

Når glassene tages af efter endt farvning, skal de skylles fri for olie med 2 x varmt sæbevand og skylles i koldt vand i 10 sek.

Derefter skal de dækkes manuelt efter dehydrering. Dehydreringen er lidt anderledes og derfor kan glassene IKKE dækkes på Coverstaineren. Processen med dehydrering forgår i Immunlabs stinkskab, hvor der står opstillet stativ og kar.

Dehydrering og glasdækning af ISH-farvninger:

  • 20 skyl i ionbyttet vand
  • 20 skyl i 70% ethanol
  • 20 skyl i 96% ethanol
  • 20 skyl i 99% ethanol
  • 20 skyl i 99% ethanol
  • 10 skyl i acetone
  • 20 skyl i xylen
  • 20 skyl i xylen
  • Manuel glassækning eller Prisma fra tørt kar

Væskerne til dehydrering hældes ud en gang om ugen (fredag), dog kan acetone være nødvendig at fylde op løbende, da den fordamper. 

 

Registering af reagenser:

  • Klik liste øverste højre hjørne
  • Klik indlæsningspen
  • Registrer på chip
  • Klik ok

 

Reagens Access point (RAP eller landing zone)/ påsætning af reagenser under en kørsel

  • Tryk til venstre kartotek ikon
  • Tryk på RAP ikonet og vælg passende tidpunkt

 

Udprint label:

  • Hus - opret mærkat, protokol og vælg den ønskede protokol, vælg tilføj, luk/print og udskriv

Tilbage til top

Ansvar og organisering

Referencer, lovgivning og faglig evidens samt links hertil

Bilag