Ved mistanke om vækst i dyrkningsmedier eller på overflader i dyrkningsmiljøet, Fertilitetslab

Formål
At beskrive hvordan der undersøges for forekomst af vækst af skimmel, gær eller bakterie i dyrkningsmiljøet (i medier, på overflader etc.) i IVF laboratoriet.

Baggrund
Hverken ægudtagning, oprensning af sædprøve eller embryodyrkning er sterile processer. Kontaminering fra miljøet eller patienterne kan forekomme. Hvis der kun observeres vækst hos en patient, mistænkes det at være patientrelateret; hvis vækst observeres i flere patienter kan det skyldes kontaminering fra laboratorie og/eller medier. Vækst i dyrkningsmedier (indeholder Gentamycin) forekommer i alle laboratorier og oftest i IVF; sjældent efter ICSI (Borges et al., 2019).
Praksis er at hvis embryoudviklingen er normal, fortsættes behandlingen. Blastocysterne skylles grundigt i dyrkningsmedie før transferering og/eller kryopræservering. Der kan vælges totalfrys, hvis uklarhed om hvilken type kontamination, det drejer sig om. Bemærk at transfereringsproceduren heller ikke er en steril proces.

Målgrupper og anvendelsesområde
Instruksen henvender sig til laboratoriets personale.

Fremgangsmåde

Utensilier
eSWAB (podepind og rør med medie samlet i et kit) 
KMA nødblanket anvendes (findes på intranet)
https://intranet.regionh.dk/heh/organisation/Afdelinger/Documents/N%C3%B8dblanket%20Hospital.pdf
Kopier af nødblanketten ligger i "Diverse-mappen" på kontoret.
Gul pose med 'lynlås' (findes i gyn amb depot)

Procedure
- Der podes fra overflade, slide, dyrkningsmedieflaske og/eller andet relevant og pinden sættes i glasset og knækkes af. 
- Mærk glas med prøve ID (eks INK 1) samt "Hygiejne" og "Fert klinik"
- I rubrikken navn og CPR skrives: "Att. Laboratoriet"
Blanket (Der ligger nogle forudfyldte i 'diverse mappen')

I feltet Navn etc. skrives:
Prøve ID:
Laboratoriet, Fertilitetsklinikken
G1A63C7F, Pavillon C
Herlev Hospital

I ’Indikation’ skrives:
Hygiejneprøve
- Under "bakterier og svampe" skrives i "Podning fra":"ANDET": eksempelvis Inkubator

Undersøges for bakterier og svampe
- Tag kopi af rekvisitionen og hæng den på tavlen i mellemgangen/slusen til æglab.
- Prøven og rekvisition lægges i gul pose (én prøve pr. pose) og lægges i køleskabet i aktuelt skylleru, (Spørg sygeplejerskerne)
- Piccolinerne henter prøven på deres faste runde.
Ved synlig vækst i dyrknings medie undersøges, om det er et enkeltstående tilfælde (en skål, en patient, en flaske etc.) og der tages også følgende aktion:

Hvis vækst i enkelt skål eller hos enkelt patient:
- Isolér denne i en inkubator (flyt til inkubator 3).
- Lav nye 4-kammerskåle til patienten.
- Skyl embryoner i 4 brønde med 500 µl dyrkningsmedie (skift pipette mellem hver brønd) og læg hvert æg i sin egen brønd i en ny 4-kammerskål med ækvilibreret dyrkningsmedie og olie.
- Der holdes øje de følgende dages embryodyrkning, og der skiftes 4-kammerskåle hver dag, hvis kontamination genfindes.
- Lav journal-notat om fundet og at der er sendt til mikrobiologerne. En læge i klinikken underrettes; det kan med fordel være lægen tilknyttet stue 1.
Undersøg om det er et inkubator problem eller et medie problem. Hvis det forekommer hos patienter i flere inkubatorer vil problemet oftest være en kontamineret flaske. 
Hvis vækst i flere patienters skåle:
- Lav nye 4-kammerskåle til patienten med medie fra nyåbnede flasker.
- Skyl embryoner i 4 brønde med 500 µl dyrkningsmedie (skift pipette mellem hver brønd) og læg æggene i hver sin brønd i en ny 4-kammerskål med opgasset dyrkningsmedie og olie.
- Lav journal-notat om fundet og at der er sendt til mikrobiologerne. En læge i klinikken underrettes; det kan med fordel være lægen tilknyttet stue 1.
- Alle patienskåle,flyttes fra inkubatoren, hvor der er fundet vækst, til inkubator 3. Inkubatoren, hvori der er fundet vækst, rengøres og desinficeres. (Se SOP for rengøring af inkubatorer.)

Hvis mistanke om et inkubator problem:
- Hvis der er vækst i dyrkningsskåle gøres som ovenfor og de nye skåle sættes i anden inkubator.
- Inkubator rengøres og desinficeres.

Behandling og kommunikation til parret/kvinden.
Fortsættelsen af behandlingen og kommunikation med parret / aftales med laboratorieleder og læge.
Praksis er at hvis embryoudviklingen er normal, fortsættes behandlingen. Blastocysterne skylles grundigt i dyrkningsmedie før transferering og/eller kryopræservering. Der kan vælges total frys, hvis uklarhed om hvilken type kontamination, det drejer sig om. Bemærk at transfereringsproceduren heller ikke er en steril proces.
Hvis aflysning pga manglende embryoudvikling, som kunne skyldes kontaminationen, kan der gives profylaktisk antibiotika ved næste OPU, hvis mistanke om kontamination fra patienten.

Ansvarlig
Ledelsen er ansvarlig for det faglige indhold af instruksen og at den er implementeret.
Den håndterende bioanalytiker er ansvarlig for at kende og anvende instruksen.

Bilag
Nødblanket

Referencer
Microbial contamination in assisted reproductive technology: source, prevalence, and cost
Borges et al., 2019, J Assist Reprod Genet