Målgrupper og anvendelsesområde/Audiences and scope
Instruktionen beskriver suPAR ELISA proceduren. Målet er at sikre korrekt analyseprocedure for suPAR.
Tilbage til top
Fremgangsmåde/Approach
- Lav nyt platelayout i Excel
- Print labels til næste kørsel
- Find prøver frem og og placer dem i korrekt rækkefølge
- Tag kittet og prøver ud af køl og frys
- Lad det tø 90 min. ved stuetemperatur
- Sæt labels på rør
- Klargør vaskebuffer og platewasher 900mL til hele flasken washer
- Vend alle rør på hovedet 5 gange
- Overfør 15µL prøve til alle de rigtige brønde
- Hvis prøve var over 20, skal den gentages fortyndet (se resultatbehandling)
- Overfør 25µL std kurve, blind(ren deluent) og curve controel til de rigtige brønde
- Bland conjugatet 70µL til 14mL diluent og vend flasken 5 gange
- Tilsæt 225µL conjungate til std kurve blind og curve controel
- Tilsæt 135µL conjungate til prøver
- Mix kolonnerne ved at hive op og ned 5 gange
- Ved 5 opsugning overfør 100µL til den gennemsigtige plade
- Sæt tape på og lad hvile i mørke 60 min.
- Fjern tapen og vask på program supernostic ELISA
- Bank pladen helt tør
- Tilsæt 100µL TMB i alle brønde
- Sæt tape på
- Lad hvile i mørke i 20 min.
- Tag tape af
- Tilsæt 100µL stop solution
- Aflæs pladen på ELISA
- Pipeter 500µL prøve i 3 rør - hvis der ikke er nok materiale, lad røret blive men sæt ikke prop på
- Sæt i kasser på frost, -18 grader
- Overfør data til triage-skema
- Marker gentagelser
Tilbage til top
Ansvar og organisering/Responsibility and organization
All analysing of suPAR at Clinical Research Centre must be carried out according to this instruction.
Tilbage til top