Målgrupper og anvendelsesområde og formål
Denne instruks gælder for alle bioanalytikere og læger, der varetager frysesnitsfunktionen
At ensarte proceduren og sikre høj kvalitet af de afgivne frysesvar.
At diskrepans mellem frysesnitdiagnose og diagnose på paraffinsnit til frysesnit registreres og opgøres, så der kan træffes forholdsregler til imødegåelse af evt. væsentlig diskrepans i fremtiden.
I forbindelse med kvalitetssikring registreres løbende overensstemmelse/diskrepans mellem frysesnitdiagnose og diagnose efter paraffinsnit til frysesnit.
Definitioner
Frysesnitsundersøgelse er ALTID HASTEUNDERSØGELSE.
Væsentlig diskrepans: Frysesnitdiagnosen afviger fra diagnosen på paraffinsnit til frysesnit i et sådant omfang, at det ville have medført ændring i operationsproceduren, hvis paraffinsnitdiagnosen var blevet afgivet. Supplerende snit udtaget til paraffinindstøbning og snit fra senere ankommet væv er ikke relevant i denne sammenhæng. "Afvent paraffinsnit" og lignende frysesnitsvar er ikke en væsentlig diskrepans.
Fremgangsmåde
Frys registreres i Modtagelsen, som også udfylder bilaget: 
Fryse-skema.xlsx
Når Prøvemodtagelsen modtager besked om, at der sendes væv til frysesnitsundersøgelse meddeler vedkommende det straks via telefon til den læge og den bioanalytiker, der har frysefunktionen.
- Yngre læge søjle 1, tlf. nr.: 25778
- Yngre læge søjle 2, tlf. nr.: 22515, alternativt frysespeciallæge 25839
- Bioanalytiker frysefunktion, tlf. nr.: 26499
Modtagelsen tilbagemelder til Operationsafdelingen, på det telefonnummer der er anført på rekvisitionen, at fryset er modtaget
Forberedelse
Frysebioanalytikeren sørger for at klargøre frysepladsen:
- Udskæringssæt lægges frem (skærebræt, saks, kniv, lineal, pincetter, skalpel)
- Farve- og dehydreringsvæsker klargøres (Husk initialer på skema)
- Rent papir, farveskåle m.m. stilles frem
- Hver mandagmorgen: Gamle væske fra ugen før hældes ud. Fyld op med frysefix, eosin og hæmatoxylin.
- Mayers hæmatoxylin filtreres hver morgen
- Når frys er meldt, skal der fyldes op med flg. alkohol: 1x70%, 1x96% og 4x99%.
- Bakker lægges klar
- Vugger til objektglas sættes frem
Etiketteudskrivning
Frysebioanalytikeren udskriver alle etiketter til fryset fra computeren i biobank.
Udskæring
- Bioanalytikeren logger på computer og lægen sættes på som udskærer.
- I fællesskab kontrolleres det, at prøve og rekvisition stemmer overens og er korrekt udfyldt
- Prøven beskrives af lægen. Bioanalytikeren agerer som sekretær, hvis lægen ikke dikterer.
- Der udtages væv til skæring. Hvert præparatbord mærkes med det tilhørende rekvisitionsnummer med bloketiket (Prøvenummer og bloknummer)
- Ved mere end 1 fryseblok eller behov for hjælp tilkaldes en anden frysebioanalytiker
- Lægen lægger evt. restvæv tilbage i bøtten.
- Lægen rengør omhyggeligt udskæringsplads med skærebræt, kniv, pincetter m.m. med 4 % kloramin og blå wetwipes (ethanol disinfection)
- Lægen rengør vasken efter eventuelt brug, så eventuelle vævsrester er fjernet
Præparering og skæring
- Der kommes OTC compound på præparatbord af bioanalytikeren, evt. forfryses inden væv kommes på.
- Lægen lægger vævsstykket på præparatbordet.
- Vævsprøven nedfryses i kvælstof.
- Der tages 3 objektglas frem, som mærkes med prøvens etiketter
- Der skæres snit i 3 niveauer, hvis vævet tillader det. Der sættes et snit på hvert glas.
HE-farvning:
- Der farves efter den til en hver tid gældende HE-frysefarveprotokol
Klarmeldning:
- Det kontrolleres, at fryseblok og snit stemmer overens
- I ’Oversigt/Klarmelding’ påføres læges initialer og der skiftes status på prøven til FRYS
- Afleveres straks til fryselægen.
Evt. dybere FHE:
- Ved ekstra bestilling af dybere FHE, skal det ønskede antal glas oprettes. Husk at rykke PHE til sidst. Dybere FHE etiket udskrives. Der skæres passende dybt og farves efter HE-protokollen som ovenfor. Dybere FHE afleveres til lægen.
Svarafgivelse:
- Når der er afgivet svar til operationsgangen, meddeler lægen til bioanalytikeren, at frysesnitsundersøgelsen er færdig.
- Lægens godkendelse af snitkvaliteten skrives i interne noter af bioanalytikeren.
Optøning og afslutning af frys
- Vævet fjernes fra cryostaten og optøs. Mærk skæresiden med en blå tusch.
- Vævet lægges i printet kapsel.
- Ved Frys "Alt væv indstøbt" afleveres kapslen til lille udskæring og skal med på natkørsel, 6 mm program på Pathos, hvis det vurderes, at vævet kan nå at blive velfikseret og velpræpareret, når det kommes frem dagen efter. Hvis ikke, skal det fikseres yderligere og først sættes på Pathos (stadig 6 mm program) dagen efter.
- Ved Frys med "Restvæv til udskæring dagen efter" skal der hældes 10 % buffet formalin på restvæv, som sættes til stor-udskæring. Fryseblokken eller blokkene står i 10% buffet formalin i en bøtte og Præpareres sammen med restvævet
- Fryseglassene lægges i glas-oplægningen
- ”Skema ved modtagelse af frys” smides til makulering.
- Glas-etiketten til paraffinblokken (PHE) kasseres. Den bliver printet ud igen, når blokken kommer frem.
Oprydning og rengøring af cryostaten efter hvert frys.
- Overskydende glas kasseres i den gule spand til glas affald. Der må ikke ligge glas tilbage på bakken.
- Cryostaten renses for snitaffald.
- Snitaffaldet lægges i en affaldspose som lukkes og lægges i en gul pose.
- Affaldsposen fra stinkskabet lukkes og lægges i den førnævnte gule affaldspose. Posen lukkes og mærkes med mærkat med Hospital, afsnit, dato, frys og initial.
- Posen lægges i affaldsarkivskab under pågældende dato
- Kammeret renses evt. med 99 % ethanol.
- Penslerne rengøres med 99 % ethanol.
- Frysebord skylles af med vand og sæbevand. Derefter skylles det igen af med vand og tørres med viskestykke.
- Udskæringssættet rengøres med 4 % kloramin og blå wetwipes (ethanol disinfection). Sættet sættes til rengøring sidst på dagen.
Læge del
Fryselægen går til fryserummet, senest når fryset er ankommet.
Mikroskopi
Lægen mikroskoperer og afgiver telefonsvar.
- Patologen siger sit navn og patientens CPR-nr. og navn samt frysesnitsdiagnosen.
- Operatøren gentager patientens CPR-nr. og navn samt frysesnitsdiagnosen.
- Operatøren er ofte ikke i stand til at skrive ned. I disse tilfælde kan fx sygeplejerske på medhør, eller en efterfølgende telefonsamtale med fx sygeplejerske på operationsstuen sikre, at svaret afgives efter principperne for sikker mundtlig kommunikation. Disse indebærer, at svaret på frysesnitsundersøgelsen skrives ned og læses op.
Efter svarafgivelse
Bioanalytikeren med frysefunktion orienteres på telefon om, at svar er afgivet, og at det nedfrosne materiale må tøs op og påhældes formalin.
Eventuelt restmateriale påhældes formalin og sættes, såfremt lægen ønsker det, til supplerende udskæring.
Lægen dikterer i MAKRO/PRÆP svartidspunkt og frysesvar.
Status forbliver FRYS. Der afgives ikke foreløbigt skriftligt svar.
Præparatglas og evt. rekvisition lægges efter svarafgivelse på oplægningsbordet i oplægningen ud for label med påskriften "HE". Frysesnit, paraffinsnit til frys samt eventuelt andet materiale fra samme operative indgreb afleveres samlet til lægen.
Som led i afdelingens kvalitetssikring af frysesnitdiagnostik tages der i forbindelse med endelig besvarelse af frysesnit efter paraffinindstøbning stilling til, om der er væsentlig diskrepans mellem den afgivne frysesnitdiagnose og diagnosen på paraffinsnit til frysesnittet (se Definitioner).
Hvis der ikke er væsentlig diskrepans mellem frysesnitdiagnose og diagnose efter paraffinsnit til frysesnit anvendes tillægskoden:
P32200 = frysesnit.
Ved væsentlig diskrepans anvendes samlediagnosen:
xfrys som omfatter P32200 (frysesnit) og PYYFFF (ændret frysesnitdiagnose).
Ansvar og organisering
Fryse-ansvarligbioanalytiker og udpeget læge har ansvar for opdateringer af proceduren.
Afdelingsledelsen for Patologiafdelingen har det overordnede ansvar.
Den enkelte læge og bioanalytiker har ansvar for at efterleve instruktionen.
Kliniske vejledere introducerer de uddannelsessøgende læger til instruktionen.