Målgruppe og anvendelsesområde
Bestemmelse af levergennemblødning v.h.a. konstant infusion af indocyaningrønt ( ICG ).
Målgruppe og anvendelsesområde
Denne instruks er gældende for alle medarbejere, der udfører denne analyse i klinisk fysiologisk/nuklearmedicinsk sektion, Funktions- og Billeddiagnostisk Enhed, Hvidovre Hospital.
Analyseprincip:
Indocyaningrønt, der er proteinbundet optages kun i leverens kupferceller og udskilles via galden. Ved en konstant infusion af ICG, samt prøver udtaget samtidigt i arterie femoralis og venae hepatica, kan levergennemblødningen bestemmes. Metoden kræver, at der til stadighed tilføres nok ICG, d.v.s. at koncentrationen i blodet ikke falder under infusionen, samt at leveren er i stand til at optage og udskille ICG. Dette betyder, at metoden ikke kan anvendes på patienter med meget dårlig leverfunktion. I disse tilfælde må man nøjes med at bestemme ICG-clearence.
ICG er en tricarbocarbocyanin med ekstensionsmaximum ved 800 nm. Plasmaets egen blindværdi korrigeres der for ved målingen på 900 nm. Blindværdien varierer ofte meget inden for patientens analyseserie.
Beregningsprincip:
Forudsætning:
ICG er plasmabundet og plasmavolumen er 5 % af legemsvægten. Metoden korrigerer for de ændringer der sker fra prøve til prøve i den perifere koncentration, udjævner samtidig mindre ændringer i levergennemblødningen og analytiske variationer.
Plasmablindværdi bestemmes ved 900 nm og korrigeres til 800 nm med en empirisk bestemt faktor. Faktor er afhængig af fotometeret.
ICG plasma conc. = [E800-(E900 x (1-EQ900)) x Eb] x EQ800 = mmol/l
I = infunderet mængde/min
V = plasmavolumen (5% af legemsvægt)
Sidste led i tæller: korrektion for akkumuleret mængde i perioden.
Nævner: a-v differens.
Flow er gennemsnit i perioden t2-t1
Derefter fortsættes (t3-t2), (t4-t3) ect.
Blood flow kan beregnes v.h.a. hæmatokritværdien.
ICG plasmaclearence, som ovenfor med Cv1 og Cv2 =0
Apparatur:
Fotometer: Shimadzu UV 160A
Eengangskuvetter: 1,5ml semi-micro(0,5cm) 12,5 x 12,5 x 48mm Brand- kat.no: 7590 15
Reagenser:
0,9% NaCl
Human Albumin CSL Behring 5%
Standard udtaget fra infusionsopløsningen
Forberedelse:
Prøvetagning:
Der tages 3ml fuldblod i hepariniserede plastglas. Prøverne tages simultant fra arterie og venae hepatica. Prøverne centrifugeres, afpippeteres og dybfryses.
Prøverne tøes op i KOLDT vand. ICG er lysfølsomt i vandig opløsning. Dæk af for lys, hvis prøverne står i længere tid. De optøede prøver vendes og centrifugeres 10 min ved 3000 omdr./min..
Infusionsstandard fortyndes 1:125 ( 400 µl inf.væske ad 50 ml ca. 0,5 % protein i 0,9 % NaCl).
Fotometeret skal have været tændt i 1 time.
Fremgangsmåde:
Plasma afpippeteres i engangskuvetter. Fotometret indstilles til 2 bølgelængder. 800 nm og 900 nm. ionbyttet H2O i referencekuvetten. Der nulstilles med en ny basislinie (Se fotometerforskrift).Ved extentioner over 1000 fortyndes med 0,5 % protein i 0,9 % NaCl indtil extentionen kommer under 1000. Plasmaet hældes tilbage i plastglasset og gemmes sammen med infusionsopløsningen i et transportbæger. Bægeret mærkes med patientetiket, sættes i fryseren. Kasseres efter 1 måned.
Benyt ICG program på computeren i fotometri.
Tag 2 print.
Ved splanchnicuslevervenekateterisation beregnes O2 uptake og tegnes kurve.
Det ene print sættes i ICG analysemappen og det andet lægges i patientens chartequet. Der skal derefter udfyldes et svarskema, som lægges i chartequet. Når svarskemaet er udfyldt med patientens analyser afleveres patient chartequet på bioanalytiker kontoret.
Referenceområde
Levergennemblødning: 0.5 – 2.3 l/min
Inducyaningrøntclearance: 300 – 700 ml/min.
Fejlkilder
Hæmolyse, lipæmi og uklart plasma kan give betydelige fejl og i værste fald kan metoden ikke anvendes. Lipæmiske prøver kan evt. ultracentrifugeres. Heparin der indeholder reduktonsmidler (f.eks. Noparin), reducerer exententionen og må derfor ikke anvendes.
Superbrugeren har ansvaret for udarbejdelse og vedligeholdelse af instruksen.
Sektionsledelsen har ansvar for at godkende og realisere denne instruks.
Alle medarbejdere som udfører galaktoseanalysen har ansvar for at følge denne instruks.
Ikke relevant
Referencer/Litteratur
Winkler et al. Scand. J,Clin. Lab. Invest. 1960, 12,353.
Ikke relevant.